离子对试剂及盐类的使用和注意事项说明
点击次数：2274次 更新时间：2022-03-25
离子对试剂及盐类是一类常用的实验室试剂，将这类试剂加入到反相色谱流动相中可以增强离子样品的保留。使用其可以改善疏水键合相表面的离子交换能力，可以在温和的流动相pH条件下更好地控制酸性或碱性样品的保留。
通过试剂上的疏水部分（常见的有庚烷基，十二烷基）与色谱柱固定相发生作用而吸附在柱床上，使固定相具有了一定的离子交换能力，从而增强对带相反电荷的分析物的保留。
离子对试剂及盐类的使用：
加入离子对的目的
加入与待测组分相反的离子，形成弱极性离子对，增强保留，改善峰形。
加入离子对的情形
反相HPLC中不保留或保留很差；
化合物有强离子官能团：磺酸基、羧基、氨基、铵基等。
注意：化合物在反相流动相体系中要有足够的溶解度，能不用就不使用。使用的色谱柱专柱专用，不同离子对可以使用同一色谱柱。
离子对试剂及盐类的注意事项：
●试剂的用量：按当量计算，浓度至少比样品浓度大4~5倍；
●磺酸类离子对不建议采用梯度洗脱；超过30%的有机相建议预混；
●有机相优先使用甲醇；建议使用进口试剂，特别是波长小于240nm时；使用容易出现鬼峰；
●温度变化对离子对色谱的影响更大；
●离子对色谱中，pH对物质保留的影响正好与普通反相色谱相反；
●经验性：加入烷基磺酸钠，碱性物质保留时间增加；中性和酸性物质保留时间减小。
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